革蘭氏染色試劑盒

保存：陰涼處保存，保質期 3-6 個月。 

產品內容: 

結晶紫；碘液；95%酒精；蕃紅。 

產品簡介： 

革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法，通過結晶紫初染和碘液媒染后，在細胞壁內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物，革蘭氏陽性菌細胞壁較厚，肽聚糖網層次較多且交聯致密，乙醇脫色時，肽聚糖脫水使孔徑縮小，故保留結晶紫-碘復合物在細胞膜上，呈紫色。革蘭氏陰性菌細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差，脫色后類脂外膜迅速溶解，縫隙加大，結晶紫與碘復合物溶出，因此乙醇脫色后再經番紅復染，呈紅色。 

操作步驟： 

1. 涂片固定

菌液涂片時不可過于濃厚，干燥、固定。固定時通過火焰1-2次即可，不可過熱，以載玻片不燙手為宜。

2. 染色 

一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟，具體操作方法是： 

（1）加上結晶紫后，染色 1 分鐘，水洗。 

（2）加上碘液后染色 1 分鐘，水洗。 

（3）加上 95%酒精,搖動玻片,根據涂片厚度,脫色約 20-60 秒，水洗，吸去水分。 

（4）加上蕃紅后，染色 1 分鐘，水洗。 

（5）吸干或在空氣中涼干后，油鏡鏡檢。 

革蘭氏染色的關鍵在于嚴格掌握酒精脫色程度，如脫色過度，則陽性菌可被誤染為陰性菌；而脫色不夠時，陰性菌可被誤染為陽性菌。此外，菌齡也影響染色結果，如陽性菌培養時間過長，或已死亡及部分菌體自行溶解，都常呈陰性反應。 

3. 結果觀察：革蘭氏陰性菌呈紅色，革蘭氏陽性菌呈紫色。以均勻分散開的細菌的革蘭氏染色反應為準，過于密集的細菌，常常呈現假陽性。

注意事項：

1．標本涂片不能太厚，嚴格按操作要求進行。若涂片較厚，應延長脫色時間，直不再出現紫色為止。 

2．玻片通過火焰溫度不能太高。 

3．碘液變透明，則不能使用。 

4．水洗時動作要輕柔,沿載玻片對角線方向用洗瓶沖洗,以免把菌體沖掉。