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    產品名稱:糖原含量檢測試劑盒

    產品型號:BC0340

    產品報價:

    產品特點:糖原含量檢測試劑盒
    測定原理:蒽酮法。利用強堿性提取液提取糖原,在強酸性條件下利用蒽酮顯色劑測定糖原含量。

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    BC0340糖原含量檢測試劑盒的詳細資料:

     

    產品名稱: 糖原含量檢測試劑盒

    產品英文名: Glycogen Assay Kit

    產品貨號:BC0340     產地:北京市通州區馬駒橋聯東U谷8三樓

    產品規格:50管/48         產品商標:solarbio
    保存與運輸:4℃保存或-20℃保存;            參考價格:190
    庫存狀態:現貨                          
    關鍵字:   糖原檢測試劑盒|糖原含量檢測試劑盒|糖原|試劑盒

    簡要介紹:
    糖原是由葡萄糖單位構成的高分子多糖,是糖的主要的儲存形式之一,主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量,分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調節血糖濃度,當血糖升高時可在肝臟合成糖原,血糖降低時,肝糖原則分解為葡萄糖以補充血糖。因此,肝糖原對維持血糖的相對平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲存形式,在劇烈運動消耗大量血糖時,肌糖原不能直接分解成血糖,必須先分解產生乳酸,隨血液循環到肝臟,通過糖異生轉變為肝糖原或葡萄糖。

    產品詳細描述
    產品內容:
    提取液:液體50mL×1 瓶,4℃保存;
    試劑一:0.1mg/mL 的葡萄糖標準液 10mL×1 瓶,4℃保存;
    試劑二:粉劑×1 瓶, 4℃保存
    產品說明
    糖原是由葡萄糖單位構成的高分子多糖,是糖的主要的儲存形式之一,主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量,分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調節血糖濃度,當血糖升高時可在肝臟合成糖原,血糖降低時,肝糖原則分解為葡萄糖以補充血糖。因此,肝糖原對維持血糖的相對平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲存形式,在劇烈運動消耗大量血糖時,肌糖原不能直接分解成血糖,必須先分解產生乳酸,隨血液循環到肝臟,通過糖異生轉變為肝糖原或葡萄糖。
    測定原理:蒽酮法。利用強堿性提取液提取糖原,在強酸性條件下利用蒽酮顯色劑測定糖原含量。
    需自備的儀器和用品:
    可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、濃硫酸(不允許快遞)和蒸餾水。
    操作步驟:

    • 糖原提取:

    1﹑細胞或細菌:收集500~1000 萬細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;加入0.75mL 提取液超聲波破碎細菌或細胞(功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30 次);轉移10mL 試管中,置于沸水浴中煮沸20min(蓋緊,防止水分散失),隔5min 振搖試管1 次,使充分混勻;取出試管冷卻后,用蒸餾水定容到5mL,混勻,待測。
    2﹑組織:稱取0.1~0.2g 樣品,置于10mL試管中;加入0.75mL提取液,置于沸水浴中煮沸20min(蓋緊,防止水分散失),隔5min 振搖試管1 次,使充分混勻;待組織全部溶解后,取出試管冷卻后,用蒸餾水定容到5mL,混勻,待測。

    • 步驟和加樣表
    • 分光光度計預熱30min 以上,調節波長620nm,蒸餾水調零。
    • 調節水浴鍋95℃。
    • 試劑二工作液的配置:在試劑二中倒入10mL 蒸餾水,緩慢倒入40mL 濃硫酸,充分溶解混勻后使用。用不完的的試劑4℃有效期一周。
    • 加樣表(在EP 管中反應):

     

    試劑空白管(μL標準管(μL測定管(μL
    糖原提取液  250
    試劑一 250 
    蒸餾水250  
    試劑二100010001000

    混勻,置水浴10min(蓋緊,防止水分散失),冷卻,于620nm 波長處,分別讀取空白管、標準管和測定管吸光度,分別記為A1A2 A3
    注意:1、空白管和標準管只要測一次。
          2、如果A3-A1 大于2,需要將樣本用蒸餾水稀釋,計算公式中乘以相應的稀釋倍數。

    • 糖原含量的計算:
    • 按照樣本質量計算

    糖原(mg/g 鮮重)=1.11×(C 標準×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)= 0.555×(A3-A1)÷A2-A1)÷W

    1. 按照蛋白質含量計算

    糖原(mg/mg prot)=1.11×(C 標準×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)=0.111×(A3-A1) ÷A2-A1) ÷Cpr
    3、按照細菌或細胞數量計算
    糖原(mg/104 cell=1.11×(C 標準×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1)÷(細菌或細胞數量×V1÷V2)
                     = 0.555×(A3-A1)÷A2-A1)÷細菌或細胞數量
        1.11:是此法測得葡萄糖含量換算為糖原含量的常數,即111μg 糖原用蒽酮試劑顯色相當于100μg 葡萄糖用蒽酮所試劑顯示的顏色;C 標準:標準管濃度,0.1mg/mLV1:加入反應體系中糖原提取液體積,0.25mLV2:提取液體積,5mL Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣本鮮重,g;細菌或細胞數量:以104為單位,萬個


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