微量 超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒

產品名稱：超氧化物歧化酶測定試劑盒 微量法
產品英文名：Micro Superoxide dismutase(SOD) Assay Kit
產品貨號：BC0175                          產地：北京市通州區馬駒橋聯東U谷8三樓
產品規格：100管/48樣                      產品商標：solarbio
保存與運輸：4℃保存或-20℃保存；           參考價格：560
庫存狀態：現貨                          
關鍵字：超氧化物歧化酶試劑盒|超氧化物歧化酶|SOD|SOD活性檢測

簡要介紹：
SOD（EC 1.15.1.1）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，催化超氧化物陰離子發生岐化作用，生成H2O2和O2。SOD不僅是超氧化物陰離子清除酶，也是H2O2主要生成酶，在生物抗氧化系統中具有重要作用。通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應系統產生超氧陰離子(O2-.)，O2-.可還原氮藍四唑生成藍色甲臜，后者在560nm處有吸收；SOD可清除O2-.，從而抑制了甲臜的形成；反應液藍色越深，說明SOD活性愈低，反之活性越高。

產品內容：
提取液：
液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×1 瓶，4℃保存，用時加 13.2mL 雙蒸水配制成懸濁液，使用前充分搖勻；
試劑三：液體 100μL×1 支，4℃保存；
試劑四：液體 4mL×1 瓶，4℃保存。
試驗中所需的儀器和試劑： 可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水

產品說明： 
SOD（EC1.15.1.1）是一種廣泛存在于生物體內的金屬酶，是重要的氧自由基清除劑，能催化超 氧化物陰離子發生岐化作用，生成 H2O2和 O2。SOD 不僅是超氧化物陰離子清除酶，也是 H2O2主要 生成酶，在生物抗氧化系統中具有重要作用。 通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應系統產生超氧陰離子(O2-)，O2-可還原氮藍四唑生成藍色甲臜， 后者在 560nm 處有吸收；SOD 可清除 O2-，從而抑制了甲臜的形成；反應液藍色越深，說明 SOD 活 性愈低，反之活性越高。

操作步驟： 
一、樣品的前處理：
1. 細菌或培養細胞：收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清，按照細菌或細胞數量（104個）： 提取液體積（mL）為 500-1000:1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液），超聲波破 碎細菌或細胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）， 8000g4℃離心 10min， 取上清，置冰上待測。
2. 組織：按照組織質量（g）：提取液體積（mL）為 1:5-10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液），進行冰浴勻漿；8000g4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
3. 血清（漿）樣品：直接檢測。
二、測定步驟：
1. 分光光度計預熱 30min 以上，調節波長 560nm，蒸餾水調零。
2. 測定前將試劑一、二和四 37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）水浴 5min 以上。
3. 樣本測定（按順序加入下列試劑）

充分混勻，室溫靜置 30min 后，560nm 處測定各管吸光值 A。計算ΔA 測定=A 測定-A 對照，Δ A 空白=A 空 1-A 空 2。如底部有沉淀，混勻后再行測定。

注意：
1、試劑二為懸濁液，注意混勻后加入。試劑三為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。 
2、樣本較多時，可按表格配置工作液（包含試劑一、二、四），試劑三必須后加入。
3、空白管 1 和空白管 2 各只需做 1~2 管；每個樣本有一個對照管。
4、反應完成后，可能有沉淀生成，混勻后測定即可。

三、SOD 活性計算：
1、 抑制百分率的計算 抑制百分率＝( ΔA 空白－ΔA 測定)÷ΔA 空白×100% 盡量使樣品的抑制百分率在 30-70%范圍內，越靠近 50%越準確。如果計算出來的抑制百分率小 于 30%或大于 70%，則通常需要調整加樣量后重新測定。如果測定出來的抑制百分率偏高，則需適 當稀釋樣品；如果測定出來的抑制百分率偏低，則需重新準備濃度比較高的待測樣品。
2、 SOD 酶活性單位：在上述黃嘌呤氧化酶藕聯反應體系中抑制百分率為 50%時，反應體系中 的 SOD 酶活力定義為一個酶活力單位。
3、 SOD 酶活性計算：
（1） 血清（漿）SOD 活性(U/mL)=[抑制百分率÷(1－抑制百分率)×V 反總]÷V 樣×樣本稀釋倍數 =11.4×抑制百分率÷(1－抑制百分率)×樣本稀釋倍數
（2）組織、細菌或培養細胞 SOD 活力計算：
A 按樣本蛋白濃度計算 SOD 活性(U/mgprot)=〔抑制百分率÷（1－抑制百分率）×V 反總〕÷（V 樣×Cpr）×樣本稀釋倍數 =11.4×抑制百分率÷(1－抑制百分率)÷Cpr×樣本稀釋倍數
B 按樣本鮮重計算 SOD 活性(U/g 鮮重)=〔抑制百分率÷(1－抑制百分率)×V 反總〕÷(W×V 樣÷V 樣總)×樣本稀釋倍數 =11.4×抑制百分率÷(1－抑制百分率)÷W×樣本稀釋倍數 C 按細菌或細胞個數計算 SOD 活力(U/104cell)=〔抑制百分率÷(1－抑制百分率)×V 反總〕÷(500×V 樣÷V 樣總)×樣本稀釋倍數 =0.0228×抑制百分率÷(1－抑制百分率)×樣本稀釋倍數
V 反總：反應體系總體積，1.026mL；V 樣：加入反應體系中樣本的體積，0.09mL；V 樣總：加 入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣品質量，g；500：細胞或細菌總數， 500 萬。

相關文獻：
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《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID:
《Amelioration of nonalcoholic fatty liver disease by swertiamarin in fructose-fed mice》 作者:Yang Yang,Li Jing,Wei Cong,He Ying,Cao Yixin ,Zhang Yongmin,Sun Wenjia,Qiao Boling,He Jiao 期刊:Phytomedicine 影響因子:4.18 PMID:31005808
《MicroRNA-98 reduces amyloid β-protein production and improves oxidative stress and mitochondrial dysfunction through the Notch signaling pathway via HEY2 in Alzheimer's disease mice》 作者:Fang?Zhou Chen， Ying Zhao， Hui?Zhao Chen 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:30365070
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《Composition Analysis by UPLC-PDA-ESI (?)-HRMS and Antioxidant Activity Using Saccharomyces cerevisiae Model of Herbal Teas and Green Teas from Hainan》 作者: Hua Li, Lanying Wang and Yanping Luo 期刊:molecules 影響因子:3.06 PMID:30301226
《A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice》 作者:Zeyong Zhang,Huanhuan Liu,Ce Sun,Qibin Ma,Huaiyu Bu,Kang Chong,Yunyuan Xu 期刊:Journal of Plant Physiology 影響因子:2.825 PMID:30055519

SOD（EC1.15.1.1）是一種廣泛存在于生物體內的金屬酶，是重要的氧自由基清除劑，能催化超 氧化物陰離子發生岐化作用，生成 H2O2和 O2。SOD 不僅是超氧化物陰離子清除酶，也是 H2O2主要 生成酶，在生物抗氧化系統中具有重要作用。 通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應系統產生超氧陰離子(O2-)，O2-可還原氮藍四唑生成藍色甲臜， 后者在 560nm 處有吸收；SOD 可清除 O2-，從而抑制了甲臜的形成；反應液藍色越深，說明 SOD 活 性愈低，反之活性越高。

SOD（EC1.15.1.1）是一種廣泛存在于生物體內的金屬酶，是重要的氧自由基清除劑，能催化超 氧化物陰離子發生岐化作用，生成 H2O2和 O2。SOD 不僅是超氧化物陰離子清除酶，也是 H2O2主要 生成酶，在生物抗氧化系統中具有重要作用。 通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應系統產生超氧陰離子(O2-)，O2-可還原氮藍四唑生成藍色甲臜， 后者在 560nm 處有吸收；SOD 可清除 O2-，從而抑制了甲臜的形成；反應液藍色越深，說明 SOD 活 性愈低，反之活性越高。

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SOD（EC1.15.1.1）是一種廣泛存在于生物體內的金屬酶，是重要的氧自由基清除劑，能催化超 氧化物陰離子發生岐化作用，生成 H2O2和 O2。SOD 不僅是超氧化物陰離子清除酶，也是 H2O2主要 生成酶，在生物抗氧化系統中具有重要作用。 通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應系統產生超氧陰離子(O2-)，O2-可還原氮藍四唑生成藍色甲臜， 后者在 560nm 處有吸收；SOD 可清除 O2-，從而抑制了甲臜的形成；反應液藍色越深，說明 SOD 活 性愈低，反之活性越高。

SOD（EC1.15.1.1）是一種廣泛存在于生物體內的金屬酶，是重要的氧自由基清除劑，能催化超 氧化物陰離子發生岐化作用，生成 H2O2和 O2。SOD 不僅是超氧化物陰離子清除酶，也是 H2O2主要 生成酶，在生物抗氧化系統中具有重要作用。 通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應系統產生超氧陰離子(O2-)，O2-可還原氮藍四唑生成藍色甲臜， 后者在 560nm 處有吸收；SOD 可清除 O2-，從而抑制了甲臜的形成；反應液藍色越深，說明 SOD 活 性愈低，反之活性越高。
 

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