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    產(chǎn)品名稱:脯氨酸(PRO)含量檢測(cè)試劑盒(微量法)

    產(chǎn)品型號(hào):

    產(chǎn)品報(bào)價(jià):

    產(chǎn)品特點(diǎn):脯氨酸(PRO)含量檢測(cè)試劑盒(微量法)
    Pro廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,逆境條件下,植物體內(nèi)Pro含量顯著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性,抗旱性強(qiáng)的品種往往積累較多的脯氨酸。因此,脯氨酸增加量可以作為抗逆育種的生理指標(biāo)之一。

    免費(fèi)咨詢:010-50973130

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    脯氨酸(PRO)含量檢測(cè)試劑盒(微量法)的詳細(xì)資料:

    脯氨酸(PRO)含量檢測(cè)試劑盒(微量法)說(shuō)明書

    貨號(hào):BC0255

    規(guī)格: 100T/96S

    脯氨酸(PRO)含量檢測(cè)試劑盒(微量法)?產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

    HYP是機(jī)體膠原蛋白主要成分之一,膠原蛋白大多分布于皮膚軟骨和血管等,因此HYP含是反映膠原組織代謝及纖維化程度的一項(xiàng)要指標(biāo)。

    樣品經(jīng)水解產(chǎn)生游離的HYP,進(jìn)一補(bǔ)被氯胺T氧化,氧化產(chǎn)物與對(duì)二甲氨基苯甲醛反應(yīng),產(chǎn)生紅色化合物,在560nm處有特征吸收峰。通過(guò)測(cè)定樣品水解液560nm吸光值,可計(jì)算HYP含

    產(chǎn)品內(nèi)容:

    組織提取液:6mol/L鹽酸,自備濃鹽酸:H2O(V/V)= 1:1,室溫保存 

    細(xì)胞提取液:液體100mL×1 瓶,4 保存  

    試劑一:液體10mL×1 瓶,4 避光保存  

    試劑二:液體10mL×1 瓶,4 避光保存

    脯氨酸(PRO)含量檢測(cè)試劑盒(微量法)操作步驟:

    一、羥脯氨酸提取:  

    1. 組織:取約0.2g 樣品于玻璃管,加入2mL的組提取液,置于110℃烘箱,水解612小時(shí),16000rpm,25℃,離心20min,用提取液定容2mL,取上清待測(cè)。  

    2.  細(xì)胞:取約500 萬(wàn)個(gè)細(xì)胞,加入1mL 的細(xì)胞提取液,于高壓消毒器中15 磅保持30min,自然降壓后待測(cè)。

    二、測(cè)定操作:

     

    對(duì)照管

    測(cè)定管

    樣本(uL)

     

    60

    試劑一(uL)

    60

    60

    混勻,室溫靜置20min

    試劑二(uL)

    60

    60

    H2O(uL)

    180

    120

    混勻,60℃,20min,取出后室溫靜置15 min,測(cè)定A560。(A560=A測(cè)定-A對(duì)照)

    羥脯氨酸含量計(jì)算:

    用微量比色皿測(cè)定的計(jì)算公式:

    標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=64.875x+ 0.0251,R2=0.9991  

    (1)按組織計(jì)算  

    HYP含量(mg/g) =(A560-0.0251)÷64.875×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)  

                             =0.154×(A560-0.0251)÷W  

    (3)按細(xì)胞計(jì)算:

    HYP含量(mg/104cell)= (A560-0.0251)÷64.875×V 反總÷V 樣×V 樣總÷細(xì)胞數(shù)量(萬(wàn)個(gè))

    =0.077×(A560-0.0251)÷細(xì)胞數(shù)量(萬(wàn)個(gè))

    V反總:反應(yīng)體系總體積,0.3mL; V樣:反應(yīng)中樣本體積,0.06mL;V樣總:加入提取液體積,mL; W:樣本質(zhì)量,g。

    用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下:

    標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=32.4375x+ 0.0251,R2=0.9991  

    (1)按組織計(jì)算  

    HYP含量(mg/g) =(A560-0.0251)÷32.4375×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)  

                             =0.308×(A560-0.0251)÷W  

    (3)按細(xì)胞計(jì)算:

    HYP含量(mg/104cell)= (A560-0.0251)÷32.4375×V 反總÷V 樣×V 樣總÷細(xì)胞數(shù)量(萬(wàn)個(gè))

    =0.154×(A560-0.0251)÷細(xì)胞數(shù)量(萬(wàn)個(gè))  

    V反總:反應(yīng)體系總體積,0.3mL; V樣:反應(yīng)中樣本體積,0.06mL;V樣總:加入提取液體積,mL; W:樣本質(zhì)量,g。

     

    注意事項(xiàng)

    1OD值大于0.8,樣品適當(dāng)稀釋再測(cè)定,注意計(jì)算公式乘以稀釋倍數(shù)

    2試劑有一定的毒性,請(qǐng)操作時(shí)做好防護(hù)措施,防止吸入或與皮膚接觸

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