產品簡介

Solarbio 通用RT-PCR試劑盒（AMV）
本試劑盒適用于各種 RNA制品的反轉錄反應以及隨后的PCR擴增。它采用AMV進行反轉錄反應，能夠獲得更長的反轉錄產物。同時，在20ul反轉錄體系和50ul PCR反應體系中，還可以一次性得到足夠量的PCR產物用于后續的克隆實驗。本試劑盒中配置的酶均為進口的酶。RT酶采用進口的AMV，所以cDNA更長，基因的信息保留得更完整！反轉錄過程中特異的R

Solarbio 通用RT-PCR試劑盒（AMV）
產品簡介：本試劑盒適用于各種 RNA 制品的反轉錄反應以及隨后的 PCR 擴增。它采用 AMV 進行反轉錄反應，能夠獲得更長的反轉錄產物。同時，在 25ul 反轉錄體系和 50ul PCR 反應體系中，還可以一次性得到足夠量的 PCR 產物用于后續的克隆實驗。本試劑盒中配置的酶均為進口的酶。RT 酶采用進口的 AMV，所以 cDNA 更長，基因的信息保留得更完整！反轉錄過程中特異的 RNase 抑制劑可有效降低由于外源 RNase 污染而導致實驗失敗的風險。本試劑盒使用方便、快捷，可廣泛用于 cDNA 克隆及目的基因檢測等分子生物學實驗。

Solarbio 通用RT-PCR試劑盒（AMV）
操作步驟：

一、反轉錄反應

1、在冰浴的無菌無 RNase 的離心管中加入如下反應成分： 0.5ug RNA 模板 5ul Oligo(dT)16引物補 RNase-free ddH2O 11.5ul

2、70℃保溫 5min 后迅速在冰上冷卻 5min，簡短離心收集反應液后加入以下各組分： 5ul 5×AMV Buffer 2.5ul dNTPs 0.5ul RNasin 0.5ul AMV 補 RNase-free ddH2O 25ul

3、42℃溫浴 60min，如果是用隨機引物，請將離心管置 37℃溫浴 60min。

4、反應后將離心管置冰上，反應產物可用于進行后續實驗或-20℃保存。

二、PCR 反應

1、按以下各組分配制 50ul PCR 反應體系： 10×PCR Buffer 5ul dNTPs 1ul 上游引物（用戶自備 10um） 1ul 下游引物（用戶自備 10um） 1ul RT 反應產物 2ul Taq Polymerase 0.5ul ddH2O x ul Total Volume 50ul

2、混勻后短暫離心，PCR 儀擴增，瓊脂糖凝膠電泳觀察結果。

注意事項：

1、用于 cDNA 合成反應的相關試劑和耗材盡可能用 DEPC 進行處理，并在高壓滅菌后使用。有些試劑不能高壓滅菌時，先用經過滅菌的器具、水等配制溶液后，再將溶液進行過濾除菌處理。

2、RNA 樣品要避免反復多次凍融，應使 RNA 在冰浴中處于融化狀態。

3、如果 PCR 效果不理想，可以適當優化條件，比如改變退火溫度或增加模板量。