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    產品名稱:D2810 DNA退火緩沖液

    產品型號:

    產品報價:

    產品特點:D2810 DNA退火緩沖液
    保存條件:
    -20℃保存,一年有效。

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    D2810 DNA退火緩沖液的詳細資料:

    D2810 DNA退火緩沖液

    把要退火的DNA oligo用經滅菌的三蒸水配制成50μM。解凍Annealing Buffer for DNA Oligos(5X),混勻備用。如經常使用,本Buffer可放置2-8℃一個月。
    2. 如下設置退火反應體系:

    Annealing Buffer for DNA Oligos(5X)20μl
    DNA oligo A(50μM)20μl
    DNA oligo B(50μM)20μl
    Nuclease-Free Water40μl
    總體積100μl


    按照上述順序依次加入各種試劑,混勻。放入PCR儀。
    3. 如下設置PCR儀進行退火反應:

    步驟溫度時間說明
    195℃2分鐘讓oligo充分變性
    2每8秒下降0.1℃,降25℃(注1)約90分鐘退火
    34℃長時間保持暫時存放


    注1:如果所用的PCR儀不具備下降0.1℃的功能,也可以設置為每90秒下降1℃。
    4. 退火結束后可以直接用于連接反應,也可以在-20℃凍存備用。如果退火結束后打算進行酶切等其它反應,好用純化試劑盒進行純化,或者確保退火產物在反應體系中體積不超過10%,以避免AnnealingBuffer對后續的酶反應體系的干擾。

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