線粒體分離和酶提取檢測試劑盒

1、準(zhǔn)確稱取約0.1g 組織或收集約500萬細(xì)胞，加入1mL試劑一和10uL試劑四，用冰浴勻漿器或研缽研磨。 2、4 ℃ 600 g 離心 5min。 3、棄沉淀，將上清液移另一離心管中，4 ℃ 11000 g 離心 10min。 4、上清液即胞漿提取物，可用于研究線粒體蛋白向胞漿的釋放。 5、沉淀為完整線粒體。含有完整的內(nèi)膜和外膜，并具有線粒體的生理功能。可用于線粒體的生理功能等方面的研究。 6、在沉淀中加入200uL試劑二和2uL試劑四，超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3秒，間隔10秒，重復(fù)30次），可用于線粒體酶活性測定。 7、在沉淀中加入200uL試劑三和2uL試劑四，超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3秒，間隔10秒，重復(fù)30次），可用于線粒體蛋白濃度測定。

線粒體分離和酶提取檢測試劑盒

試劑一：50mL×1 瓶，-20℃保存；試劑二：10mL×1 瓶，-20℃保存；試劑三：10mL×1 瓶，-20℃保存；試劑四：1mL×1 支，-20℃保存；

1、分離線粒體和提取線粒體蛋白質(zhì)的所有步驟均需在冰上或 4℃進(jìn)行，所用溶液需冰浴或 4℃預(yù)冷。 2、通常在分離線粒體時(shí)前后兩次離心速度選取 600g 和 11,000g，如果希望純度更高，但對線粒體的得率要求不高，前后兩次離心速度可以采用 1000g 和 3500g。

3、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作