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更新時間：2015-12-28
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近遇到一個問題：免疫沉淀后，抗體和Protein A/G beads 交聯劑是什么？
圖一：未結合抗體
圖二：抗體被共價結合到蛋白A，G上
為了將抗體共價耦聯到瓊脂固相化的Protein A或G上，這里DSS交聯劑就發揮作用了，它的特點有：
? 抗體非共價結合到蛋白 A/G Plus上
? DSS交聯劑共價結合抗體和蛋白A/G Plus
? 抗體不被洗脫下來
為此，科普了一下交聯劑相關的信息。
什么是交聯劑？
交聯劑是一類小分子化合物，分子量一般在200-600之間，具有2個或者更多的針對特殊基團（氨基、巰基等）的反應性末端，可以和2個或者更多的分子分別偶聯從而使這些分子結合在一起。在生命科學研究中，巧妙地運用交聯劑可以使很多工作取得突破。
目前已經被廣泛地應用于：細胞膜結構研究，蛋白質結構研究，蛋白質間相互作用研究，生物daodan研究，載體蛋白與半抗原的連接，蛋白質或其他分子的固相化，抗體的標記，標記轉移，蛋白質與核酸的連接。
如何選擇交聯劑？
交聯劑的選擇基于它們的化學反應性（例如：對于特定官能團的專一性）以及其他與預期應用相關的因素，包括：
? 化學特異性
? 間隔臂長度
? 水溶性和細胞膜通透性
? 相同的或不同的反應基團（同雙功能與異雙功能比較）
? 自發反應或光反應性基團
? 間隔臂是否可被剪切
? 包含可被放射性標記或其他方式標記的部分
活性交聯劑基團與其官能團靶點
反應基團 | 官能團靶點 |
芳基疊氮化物（Aryl Azide） | 非選擇性（或伯胺） |
碳化二亞胺（Carbodiimide） | 胺/羧基（-NH2/-COOH） |
zhong氮甲烷（Diazirine） | 非選擇性 |
酰肼（Hydrazide） | 醛（-CHO）（氧化的碳水化合物） |
羥甲基膦（Hydroxymethyl Phosphine） | 胺（-NH2） |
亞胺酸酯（Imidoester） | 胺（-NH2） |
馬來酰亞胺（Maleimide） | 巰基（-SH） |
鹽乙酸酯（溴代或碘代） （Haloacetate（Bromo- or Iodo-）） | 巰基（-SH） |
N-羥基琥珀酰亞胺酯（NHS-ester） | 胺（-NH2） |
五氟代苯酯（PFP-ester） | 胺（-NH2） |
補骨脂素（Psoralen） | DNA和RNA |
吡啶基二硫化物（Pyridyl Disulfide） | 巰基（-SH） |
乙烯基砜（Vinyl Sulfone） | 巰基，胺，羥基 |
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