常用細胞固定液及優(yōu)缺點比較

細胞固定液作用是殺死細胞，固定細胞形態(tài)。下面列舉幾種常用細胞固定液及優(yōu)缺點比較。

1. 冷丙酮 可用于一般的免疫組化染色。

將純的丙酮預先放入冰箱-20℃后便為冷丙酮（放心，丙酮在此溫度不會為固體的）細胞爬片取出后，PBS洗2遍，便可加入冷丙酮于-20℃（丙酮有很強的揮發(fā)性，注意將含有丙酮和爬片的器皿蓋嚴，防止其揮發(fā)）固定10分鐘。取出后，室溫吹干，然后放入-20℃保存。

2. 多聚甲醛(常用4%)：可用于免疫電鏡；也可用于免疫熒光以及TUNEL染色。 

主要檢測組織內一些性能嬌弱的抗原特別是細胞表面抗原，例如各類淋巴細胸分化決定簇(CD)、主要組織相容性抗原等

室溫固定15分鐘后，將表面液體吹干，入-20℃保存

3. 95％乙醇，可用于免疫組化。

優(yōu)點：穿透性強、抗原性保存較好。

缺點：但醇類對低分子蛋白質、多肽及胞漿內蛋白質保存效果較差，使蛋白變性的作用輕，固定后可再溶解；染色過程中，溫育時間長，抗原可流失而減弱反應強度

室溫固定15分鐘后，將表面液體吹干，入-20℃保存

4. 甲醛(福爾馬林)應用廣 

優(yōu)點：形態(tài)結構保存好，且穿透性強，

缺點： 甲醛放置過久可氧化為甲酸，使溶液pH降低，影響染色； 分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結構可能部分或充分掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露。可造成假陰性的染色結果。