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    EDTA脫鈣液的使用指南
    脫鈣是制作骨組織切片的重要環節,尤其是要進行免疫組織化學染色的骨組織。為達到骨組織既充分脫鈣,又保護骨組織中的抗原不被破壞,需要對含鈣的組織固定之后再進行脫鈣,然后再行常規制片ChemicalbookDTA脫鈣液與羥基磷灰石結晶的外層鈣結合,形成可溶性的非離子化合物,同時又促進晶體內層的結合鈣向外轉移。借助這種連續性的作用使羥基磷灰石晶體逐漸融解,且pH中性時可起螯合作用。

    EDTA脫鈣液的操作步驟:

    1、骨組織脫鈣時,取材不易過厚,一般大約 5mm

    2、組織固定后,用 PBS 清洗 3 次,每次 20min

    3、組織用蒸餾水洗清洗 3 次,每次 20min

    4、組織轉移 2030 倍體積的 EDTA脫鈣液中,脫鈣 1030 天或更長時間。如果想加快脫鈣速度,可以置于 37℃進行脫鈣。如果必要,更換新的 EDTA 脫鈣液繼續脫鈣,多數組織脫鈣 2 周~3 個月即可,每周更換一次,直終點。亦可采用微波快速脫鈣法:微波爐設在 200W 左右的檔位,每次加熱 5min,依據組織厚度和密度重復 35min,中間間隔 35min

    5、用蒸餾水沖洗數次。

    6、常規脫水、包埋。

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