• <button id="0080q"><dl id="0080q"></dl></button>
    <button id="0080q"><input id="0080q"></input></button>
    歡迎來北京索萊寶科技有限公司!我們將為您提供周到的服務!
    產品分類Product categories
    首頁 > 技術文章 > 分享一下CCK-8試劑盒的正確操作步驟
    分享一下CCK-8試劑盒的正確操作步驟
       CCK-8的英文全稱是Cell Counting Kit-8,也就是進行細胞計數的一個盒子。那它的用途也就大致可以猜到,和細胞增殖、細胞毒性相關的實驗都可以。
     
      CCK法的操作步驟:
     
      實驗一:細胞活性檢測
     
      1、在96孔板中接種細胞懸液(100μL/孔)。將培養板放在培養箱中預培養(37℃,5% CO2)。
     
      2、向每孔加入10 μL CCK溶液(注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響OD值的讀數)。
     
      3、將培養板在培養箱內孵育1-4小時。
     
      4、用酶標儀測定在450nm處的吸光度。
     
      5、若暫時不測定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。24小時內測定,吸光度不會發生變化。
     
      實驗二:細胞增殖-毒性檢測
     
      1、在96孔板中配置100μL的細胞懸液。將培養板在培養箱預培養24小時(37℃,5% CO2)。
     
      2、向培養板加入10μL不同濃度的待測物質。
     
      3、將培養板在培養箱孵育一段適當的時間(例如:6、12、24或48小時)。
     
      4、向每孔加入10μL CCK溶液(注意不要再孔中生成氣泡,它們會影響OD值的讀數)。
     
      5、將培養板在培養箱內孵育1-4小時。
     
      6、用酶標儀測定在450nm處的吸光度。
     
      7、若暫時不測定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。24小時內測定,吸光度不會發生變化。
     
      注意:如果待測物質有氧化性或還原性的話,可在加CCK之前更換新鮮培養基(除去培養基,并用培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的培養基),去掉藥物影響。當然藥物影響比較小的情況下,可以不更換培養基,直接扣除培養基中加入藥物后的空白吸收即可。

    版權所有  ICP備案號: 管理登陸 技術支持:化工儀器網   總流量:1167176  網站地圖

    主站蜘蛛池模板: 虞城县| 曲阳县| 米易县| 凉山| 梨树县| 剑川县| 临洮县| 武川县| 北川| 江门市| 长沙市| 江安县| 韩城市| 横山县| 和龙市| 黔西县| 枞阳县| 临沭县| 焦作市| 翁牛特旗| 六枝特区| 乐至县| 垫江县| 桦南县| 新龙县| 通河县| 巍山| 涟源市| 华亭县| 建昌县| 湘乡市| 东乡族自治县| 晋州市| 静宁县| 新闻| 滁州市| 固始县| 北碚区| 浪卡子县| 广河县| 新巴尔虎左旗|