如何配制及使用嘌呤霉素

 

　　嘌呤霉素可由白色鏈球菌發酵制得的抗生素。熔點175.5～177.0℃。旋光度-11 （乙醇）。在酸性溶液中分解成為6-二甲胺嘌呤，O-甲基-L-酷氨酸及3-氨基-3-去氧核糖。結構與氨基酰tRNA分子中腺苷相連結的氨基酸末端基因相似，因而它可作氨基酰tRNA的類似物，從而取代一些氨基酰tRNA進入核糖體的A位與正在延伸的多肽鏈結合，當延長中的肽轉入此異常A位時，容易脫落，以肽基嘌呤霉素的形式從核糖核蛋白體上早期解離,終止肽鏈合成,從而抑制了蛋白質的合成。由于嘌呤霉素對原核和真核生物的翻譯過程均有干擾作用，故難于用做抗菌藥物，主要用作研究蛋白質合成的生物化學工具。有人試用于腫瘤治療。

 

　　配制方法:

 

　　先將使用到的所有器具去除內毒素和其它污染源，儀器表面、工作臺面消毒。

 

　　在分析天平上稱取嘌呤霉素粉末0.050 g，加10 mL 無菌HEPES溶液溶解。

 

　　用的超濾濾膜過濾到去除內毒素的容器中，然后分裝到 1.5 mL EP管中。

 

　　不建議使用螺旋蓋管子，容易污染。-20度保存。

 

　　為避免污染和失效，建議分裝成小規格的，如100 uL。

 

　　用途：

 

　　嘌呤霉素在分子生物學和細胞生物學中常作為穩定細胞系篩選用試劑。在使用帶有PuroR篩選標記的載體DNA轉染動植物細胞時，向動植物細胞培養基加入嘌呤霉素可以殺死沒有被轉染的細胞，篩選出陽性轉染細胞，建立穩定細胞系。嘌呤霉素可以在較低濃度水平起作用，作用快，在不到1周的時間內篩選出穩定細胞系。