細胞凋亡染色試劑盒的使用詳細說明
使用說明 ：
一 、 制作標準曲線 （ 測定細胞具體數量時）
1、先用細胞計數板計數所制備的細胞懸液中的細胞數量，然后接種細胞。
2、按比例依次用培養基等比稀釋成一個細胞濃度梯度，一般要做 3-5 個細胞濃度梯度，每組 3-6 個復孔。
3、接種后培養細胞貼壁，然后加 CCK-8 試劑培養一定時間后測定 OD 值，制作出一條以細胞數量為橫坐標（X 軸） ，OD 值為縱坐標（Y 軸）的標準曲線。根據此標準曲線可以測定出未知樣品的細胞數量（試用此標準曲線的前提是實驗的條件要一致，便于確定細胞的接種數量以及加入 CCK-8 后的培養時間。 ）
二 、 細胞活性檢測
1、在 96 孔板中接種細胞懸液（100?L/孔） 。將培養板放在培養箱中預培養（在 37℃,5% CO 2 的條件下） 。
2、向每孔加入 10?L CCK-8 溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響 OD 值的讀數） 。
3、將培養板在培養箱內孵育 1-4 小時。
4、用酶標儀測定在 450nm 處的吸光度。
5、如果暫時不測定 OD 值，打算以后測定的話，可以向每孔中加入 10?L 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液，并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。在 24 小時內吸光度不會發生變化。
三 、 細胞增值- 毒性檢測
1、 在 96 孔板中配置 100 ?L 的細胞懸液。 將培養板在培養箱預培養 24 小時 （在 37 ℃， 5% CO2 的條件下） 。
2、 向培養板加入 10?L 不同濃度的待測物質。 在培養箱孵育一段適當的時間 （例如： 6、 12、 24 或 48 小時） 。
3、向每孔加入 10 ?L CCK-8 溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響 OD 值的讀數） 。如果待測物質有氧化性或還原性的話，可在加 CCK-8 之前更換新鮮培養基（除去培養基，并用培養基洗滌細胞兩次，然后加入新的培養基） ，去掉藥物影響。
4、將培養板在培養箱內孵育 1-4 小時。
5、用酶標儀測定在 450 nm 處的吸光度。
6、如果暫時不測定 OD 值，打算以后測定的話，可以向每孔中加入 10?L 0.1M 的 HCl 或者 1%SDS(W/V)溶液，并遮蓋培養板避光保存在室溫條件下。在 24 小時內吸光度不會發生變化。
活力計算：.
細胞活力（％）=[A(加藥)－A(空白)]／[ A(0 加藥)－A(空白)]×100
A（加藥） ：具有細胞、CCK-8 溶液和藥物溶液的孔的吸光度
A（空白） ：具有培養基和 CCK-8 溶液而沒有細胞的孔的吸光度
A（0 加藥） ：具有細胞、CCK-8 溶液而沒有藥物溶液的孔的吸光度
細胞活力：細胞增殖活力或細胞毒性活力
更新時間：2017-11-01
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標準品
