渥曼青霉素試劑應(yīng)用案例

　　應(yīng)用實(shí)例（僅作參考）：

　　為檢測(cè)wortmannin對(duì)PI3激酶和PLK1的抑制作用，先用不同濃度的wortmannin（0.25-50nM）預(yù)處理可溶的Jurkat片段10min，然后用AX7503（50nM）處理60min，發(fā)現(xiàn)wortmannin抑制PI3激酶和PLK1的IC50值分別為5.8nM和2.1nM。為檢測(cè)wortmannin在體內(nèi)對(duì)PLK1的抑制作用，先用10μM nocodazole（抗腫瘤藥）處理Jurkat細(xì)胞15h（G2/M期阻滯），再用不同濃度的wortmannin（5,25,100,500nM）處理完整細(xì)胞30min（對(duì)照組用DMSO），發(fā)現(xiàn)PI3激酶和PLK1的活性都有降低，但是wortmannin對(duì)PI3激酶的抑制作用更。

　　為檢測(cè)wortmannin對(duì)胰島素代謝活性的作用，1μM wortmannin與不同濃度的胰島素（0-100nM） 和1nM胰島素與不同濃度的wortmannin（0-1μM）分別孵育大鼠脂肪細(xì)胞20min，胰島素即使在高濃度（0.1μM）時(shí)其活性也可以被wortmannin抵消，而0.03μM wortmannin就可以抑制胰島素水平，在0.1μM時(shí)可以*抑制胰島素。為檢測(cè)wortmannin對(duì)脂肪細(xì)胞中PI 3激酶活性的抑制作用，用不同濃度的wortmannin（0,1,10,100,1000nM） 進(jìn)行處理，0.1μM wortmannin 可以*抑制PI-3激酶活性，wortmannin具有選擇性，在相同濃度時(shí)不會(huì)抑制PI-4激酶。

　　渥曼青霉素試劑是一種，不可逆的PI3K特異性抑制劑（IC50=2-5 nM），分離自絲狀真菌Penicillium funiculosum,抑制活性高于另外一種常用的PI3K抑制劑LY294002。